QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit (25)

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产品名称 : QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit (25)
产品品牌 : Qiagen
  • 20分钟内快速纯化至多24个样本
  • 利用真空装置,可同时处理多个样本
  • 低洗脱体积确保高浓度的DNA
  • 独特的洗涤缓冲液确保较低的内毒素水平
  • 适合多种应用
QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit可超快速、大规模纯化获得至多250 μg高纯度质粒DNA。通过真空装置可同时纯化至多24个样本,减少手动操作时间。低洗脱体积确保获得高浓度质粒DNA,无需乙醇沉淀,即可直接应用。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit含有新型的洗涤缓冲液,用于去除内毒素。纯化得到的质粒DNA适合多种应用,包括在敏感细胞株中转染。

 

性能
稳定的质量和性能

QIAGEN Plasmid Plus技术可达到与阴离子交换技术相同的性能和品质。QIAGEN Plasmid Plus纯化柱独特的结合试剂确保得到高纯度质粒DNA。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit提供高产量的实验方案和额外缓冲液,得到多达250 μg的高纯度质粒DNA,无RNA、蛋白质和基因组DNA等污染物(参见High yields are ensured with QIAGEN Plasmid Plus Kits (QPP)Analytical chromatogram)。

转染级质粒DNA,内毒素水平低

内毒素,又名脂多糖或LPS,在纯化质粒过程的裂解步骤释放,是革兰氏阴性菌如E. coli细胞膜的组成部分。内毒素能引起非特异性免疫应答,这是转染实验的非可控变量,影响实验结果和重复性,使其难以比较和解释。

该试剂盒提供的洗涤缓冲液可将内毒素水平降至1 EU/μg DNA以下。(依宿主菌、培养基和细胞密度的不同而不同,如果细胞密度较高,内毒素水平也略高,在1–3 EU/μg DNA范围内。)这使得到的质粒DNA适合多种应用,包括在敏感细胞系中转染(参见Endotoxin levels using QIAGEN Plasmid Plus KitsEndotoxin levels using different isolation methodsEfficient transfection in sensitive cell lines)。

原理

QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit进行大规模质粒纯化,方便快捷。独特设计的QIAGEN Plasmid Plus纯化柱和创新的结合试剂,使其只需简单的结合–洗涤–洗脱过程。QIAGEN Plasmid Plus Kits可在20分钟内实现快速大规模的midi质粒制备。得到高浓度质粒DNA,无需乙醇沉淀可直接用于下游各种应用。该质粒DNA适用于要求小体积量的应用。

使用LyseBlue试剂,产量最大化

该试剂盒也包含LyseBlue指示剂,用于指示最佳的缓冲液混合状态。通过简单的颜色变化,就可避免常见的手动操作失误,防止细胞裂解不充分及SDS、基因组DNA和细胞碎片沉淀不完全。这种独特的缓冲液添加剂确保了细胞充分裂解和完全中和,使产量最大化。

操作流程
QIAGEN Plasmid Plus Kits提供的QIAfilter试剂条能快速澄清裂解液。一步即可将裂解液装入柱中,节约时间。使用真空装置(如QIAvac 24 Plus)抽吸澄清的裂解液及后续的洗涤缓冲液,使其流过QIAGEN Plasmid Plus离心柱。将膜洗涤和干燥后,即可通过离心获得高浓度DNA(参见QIAGEN Plasmid Plus procedure)。
应用

QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit纯化得到的转染级质粒DNA适合多种应用,例如:

转染多数细胞系(敏感细胞系如Huh-7)
限制性酶切
克隆
体外转录和翻译
测序