QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep Kit (4)

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产品名称 : QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep Kit (4)
产品品牌 : Qiagen
质粒DNA产量高。
使用QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep Kit,从LB培养基上生长的E. coli DH5培养物中纯化pCMVβ质粒DNA。采用吸光度测量法进行DNA定量,并通过琼脂糖凝胶分析确认。使用QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep Kit可获得高产量。
 
性能
即用型质粒DNA,产量高且稳定

QIAGEN Plasmid Plus技术可达到与阴离子交换技术相同的性能和品质。可纯化获得多达50 μg的转染级质粒DNA(参见High yields of plasmid DNA)。

极低的内毒素水平

该试剂盒应用内毒素去除缓冲液可有效降低内毒素水平至1 EU/μg DNA,得到的质粒DNA适合在敏感细胞系中转染(参见Very low endotoxin levelsHighly efficient transfection into a sensitive cell line)。

原理
QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep and BioRobot Kits基于QIAGEN Plasmid Plus技术,提供纯化质粒的创新方法。该操作流程基于非离液盐结合试剂,选择性好,且获得的DNA的品质与采用阴离子交换技术。裂解物澄清后,只需简单的结合-洗涤-洗脱过程,就可得到高浓度的质粒DNA,可直接用于下游应用。独特的试剂和Plasmid Plus 96板的设计确保了高效的结合能力。
操作流程
应用96孔板纯化质粒这种创新方法,只需简单的结合-洗涤-洗脱过程,就可得到高纯度转染级质粒DNA,(参见QIAGEN Plasmid Plus 96 procedure)。

QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep首先采用碱性裂解法,中和后,裂解物使用TurboFilter 96孔板澄清。澄清后的裂解物中加入非离液盐结合缓冲液确保质粒DNA充分与Plasmid Plus 96孔板的膜进行结合。独特的结合缓冲液可确保获得的DNA品质相当于采用阴离子交换技术制备的质粒DNA。内毒素去除缓冲液洗涤后,内毒素水平低至1 EU/μg DNA, 得到的DNA适合在敏感细胞系中转染(参见Highly efficient transfection into a sensitive cell lines)。QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep专有的结合试剂可从5 ml E. coli培养液中每孔可纯化获得多达50 μg转染级质粒DNA。(参见High yields of plasmid DNA)。

方便、灵活的操作选择

可在BioRobot Universal System上通过QIAGEN Plasmid Plus 96 BioRobot Kit进行自动纯化。也可将QIAvac 96与TurboFilter 96孔板配套使用,清洗裂解物,随后在Plasmid Plus 96板上进行DNA结合和洗涤。然后在QIAvac 96或兼容的离心机上进行烘干和洗脱。此外,整个流程都可在兼容的离心机上进行。

应用

QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep and BioRobot Kits纯化得到的质粒DNA,适合多种应用,包括:

转染,包括敏感细胞系转染
制备短发夹载体(sh载体)
酶修饰
克隆 
限制性酶切