DAPI 即 4',6- 二脒基 -2- 苯基吲哚 (4',6-diamidino-2-phenylindole) ﹐是一种能够与 DNA 中大部分 A ， T 碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为 DAPI 可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
在荧光显微镜观察下， DAPI 染剂是利用紫外光波长的光线激发。当 DAPI 与双股 DNA 结合时，最大吸收波长为 358nm，最大发射波长为 461nm ，其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。 DAPI 也可以和 RNA 结合，但产生的荧光强度不及与DNA 结合的结果，其发散光的波长范围约在 400nm 左右。
DAPI 的发散光为蓝色，且 DAPI 和绿色荧光蛋白 (Green fluorescent protein, GFP) 或 Texas Red 染剂 ( 红色荧光染剂 )的发散波长，仅有少部分重叠，研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
DAPI 能快速进入活细胞中与 DNA 结合，因此 DAPI 对生物体而言，也被视为一种毒性物质与致癌物。使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。
DAPI
中文名： 4 ， 6- 联脒 -2- 苯基吲哚 (?)
英文名： 4',6-diamidino-2-phenylindole ， 2-(4-amidinophenyl)-1H -indole-6-carboxamidine ， DAPI dihydrochloride
分子式： C16H15N5
分子量： 277.324
CAS number ： 28718-90-3
光谱性质：与双链 DNA 结合时最大吸收 / 最大发射为 358 nm/461 nm ；与 RNA 结合时，最大发射移动到 400 nm 左右。
染色原理：
DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链 DNA 结合而发挥标记的作用，可以产生比 DAPI 自身强 20 多倍的荧光，和 EB 相比，对双链 DNA 的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高 ( 几乎为 100 %) ，且对活细胞无毒副作用。 DAPI 染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。 DAPI 也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA 染色。细胞经热激处理后用 DAPI 染色 3 分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。
a 、 正常的烟草细胞核：核形完整，染色质均匀。
b 、 染色质固缩，向外周聚集，形成周边化。
c 、 染色质进一步固缩，形成很多颗粒物质。
d 、 细胞核破裂形成碎片，核解体。
染色步骤：
在细胞移植前，将 DAPI 以一定的浓度加入培养基中，与细胞共同孵育过夜，用 PBS 缓冲液漂洗至少 6 次以洗掉未结合的DAPI ，在用酶消化后离心收集细胞，加入 DMEM 培养基制成细胞悬液以备用。
存储条件： -20 ℃ 避光保存
注意事项：
1 、 DAPI 强烈致癌，操作时要戴上手套。
2 、贮存液用 70% 酒精配制，浓度 100 µg/ml ，可用黑纸包住，长期冻存。使用液按 1:1000 用 PBS 稀释，最终浓度100 ng/ml 。
3 、 DAPI 是非常优秀的 DNA 染料，固定过和没有固定过的活细胞均可用 DAPI 染色。
